Introdução

A doença de Crohn perianal (CDp, em sua sigla em inglês) ocorre em até 40% dos pacientes com DC e se associa com uma má qualidade de vida, respostas limitadas ao tratamento e uma etiologia pouco conhecida. Por este motivo, Akhlaghpour e colaboradores (2023) realizaram um estudo de associação genética comparando pacientes com DC, com e sem doença perianal e posteriormente realizou-se estudos de seguimento funcional para um SNP associado a pCD no fator B do complemento (CFB).

Uma metanálise fora baseada em imunochip de desenho em 4.056 pCD e 11.088 pacientes com DC de três coortes independentes. As variáveis sorológicas e clínicas foram analisadas mediante a uma análise de regressão. O alelo de risco de rs4151651 foi introduzido em um plasmídeo CFB humano mediante mutagênese dirigida ao local. A união de G252 ou S252 CFB recombinantes a C3b e seu clivagem foi determinada em ensaios livres de células. A fagocitose de macrófagos na presença de CFB recombinante ou soro de risco de CFB, ou CD protetoras ou indivíduos saudáveis ​​foi avaliada por citometria de fluxo.

Resultados

As complicações perianais foram associadas com a afetação do cólon, a sorologia OmpC e ASCA e a pontuação de soma dos quartis de sorologia. Identificou-se uma associação genética para pCD (rs4151651), um SNP não sinônimo (G252S) em CFB, nas três coortes. O CFB S252 recombinantes havia reduzido a união C3b, sua clivagem foi prejudicada e a fagocitose induzida pelo complemento e a secreção de citocinas foram reduzidas em comparação com CFB G252. A serina 252 gera um sítio de glicosilação de novo no CFB. O soro de pacientes homozigotos de risco apresentou fagocitose de macrófagos significativamente menor em comparação com o soro sem risco.

Conclusão

O rs4151651 associado com pCD em CFB é uma mutação de perca da função que afeta sua clivagem, a ativação da via alternativa do complemento e a fagocitose de patógenos, o que implica a via alternativa de complemento e CFB na etiologia de pCD.

Comentários

Os investigadores de Cedars-Sinai identificaram uma variante genética que aumenta o risco das pessoas de desenvolver doença de Crohn perianal. Essa gera mudanças no DNA que conduz uma perda da função da proteína, o que por sua vez altera a forma em que o corpo reconhece e maneja as bactérias, o que as fazem ser menos efetivas para combater infecções.

"A doença de Crohn com fistulização perianal pode ser uma condição realmente miserável", disse o co-autor sênior do estudo Dermot McGovern, MD, PhD, diretor de Pesquisa Translacional do Cedars-Sinai F. Foundation Intestinal Immunobiology and Inflammation Research Institute. Widjaja e L. e Lisa Z. Greer Presidente em Genética da Doença Inflamatória Intestinal. “As terapias atuais realmente não são muito boas, então este estudo abordou uma área muito importante de necessidades médicas não atendidas. Ao compreender melhor as causas subjacentes, podemos começar a desenvolver novas estratégias de tratamento para pacientes diagnosticados com esta condição inflamatória crônica, a maioria dos quais atualmente necessita de cirurgia”.

“Tivemos muito mais sucesso na identificação de variantes genéticas associadas ao risco de desenvolver doenças, mas o que fizemos aqui centrou-se especificamente numa manifestação muito complicada e grave da doença de Crohn. E essa é uma abordagem incomum na pesquisa genética”, disse Talin Haritunians, PhD, professor assistente de pesquisa no Laboratório McGovern e co-autor sênior do estudo.

Para descobrir variantes genéticas com um vínculo direto com esta manifestação, os investigadores analisaram dados genéticos de três coortes independentes de pacientes com doença de Crohn. Os grupos incluíram uma coorte de Cedars-Sinai, uma coorte genética internacional recrutada em mais de 20 países e uma coorte recrutada em sete centros médicos de pesquisa acadêmica nos Estados Unidos. Os três grupos totalizaram 4.000 pacientes com doença de Crohn perianal e mais de 11.000 pacientes com doença de Crohn sem a complicação.

A equipe de cientistas comparou as coortes para ver se conseguiam detectar loci genéticos, que são áreas do genoma associadas ao desenvolvimento dessa manifestação. Identificaram 10 novos loci genéticos e 14 conhecidos de doenças inflamatórias intestinais associados ao desenvolvimento de complicações perianais.

Durante a análise de caracterização funcional, a equipe se concentrou em uma única alteração em um gene específico, denominado SNP, que estava associado à doença de Crohn perianal. Essa variante genética afeta uma proteína chamada Fator B do Complemento (CFB), levando à perda da função dessa proteína importante no combate às infecções, por isso é possível que pacientes com essa alteração genética tenham maior probabilidade de ter a doença.

Os pesquisadores realizaram múltiplas análises para confirmar que realmente há uma perda de função do Fator B do Complemento (CFB), que pode ter um impacto dramático no corpo.

“No caso de você ter essa mutação que leva a uma proteína não funcional, você não obtêm a cascata de sinalização normal e o corpo não reconhece que as bactérias são prejudiciais e, portanto, essas bactérias não são eliminadas”, disse co-autora principal do estudo, Kathrin Michelsen, PhD, professora assistente de pesquisa de Medicina e Ciências Biomédicas no Cedars-Sinai. “Então, para os pacientes que têm doença de Crohn perianal, existem conexões que se formam do reto até a área da pele. E esses túneis estão cheios de bactérias que não são eliminadas.”

Michelsen também observou que o estudo demonstra um papel importante para a via alternativa do complemento e o CFB no desenvolvimento da doença de Crohn perianal. Os resultados também sugeriram que direcionar a via alternativa do complemento pode ser uma nova abordagem terapêutica para tratar esta manifestação incapacitante da doença de Crohn.